Tira de prueba rápida de β-lactámicos y tetraciclinas de alta sensibilidad 96T 10min (BT) para la detección de residuos de antibióticos en leche

La prueba combinada BT es un ensayo cualitativo y rápido de flujo lateral diseñado para detectar residuos de antibióticos beta-lactámicos y tetraciclinas en leche de vaca cruda mezclada. Esta prueba utiliza un receptor de tetraciclina y una novedosa proteína de unión a beta-lactámicos que elimina la necesidad de un bloque calefactor. Esta prueba está diseñada para uso en el punto de atención o en laboratorios de referencia.

La línea C indica la presencia del antibiótico correspondiente en la leche. Cuanto mayor sea la reducción en la intensidad de la señal en la línea de prueba, mayor será la concentración de tetraciclina o antibióticos beta-lactámicos presentes en la leche. El ensayo también está diseñado para detectar simultáneamente antibióticos de tetraciclina y beta-lactámicos.

La prueba combinada BT tiene capacidad para 96 determinaciones. La vida útil es de 12 meses si el kit se almacena correctamente. Los viales de control positivo y negativo contienen muestras de leche cruda liofilizada y deben reconstituirse con 1 ml de agua destilada antes de su uso. El vial de control positivo está fortificado con 4 ppb de Penicilina G y 100 ppb de Oxitetraciclina. Los controles de leche cruda reconstituida son estables durante 48 horas a 4 °C. Hay viales de control positivo y negativo adicionales disponibles por separado.

El ensayo utiliza un formato competitivo basado en oro coloidal. La muestra de leche (200 µL) se añade a un recipiente de plástico transparente y se utiliza para redisolver los reactivos liofilizados hasta obtener un color rosa uniforme en el fondo de los pocillos de microplacas. La leche se incuba brevemente (3 min) para permitir que las proteínas de unión a antibióticos en las partículas de oro se unan a cualquier antibiótico presente en la leche.

A continuación, la tira de prueba se inserta en el pocillo de muestra con las flechas apuntando hacia abajo, iniciando el flujo capilar hacia arriba de la tira. Cualquier partícula de oro que no esté complejada con antibióticos presentes en la leche se unirá a su respectiva línea de prueba, formando una señal (línea roja) en esa posición. Cada tira de prueba está impresa con dos líneas de prueba y una línea de control (línea C). Una línea de prueba permite la detección de tetraciclinas y la otra la detección de antibióticos beta-lactámicos.

Si la proteína de unión en la partícula de oro se ha unido a una tetraciclina o a un antibiótico beta-lactámico presente en la muestra de leche, la partícula de oro fluirá más allá de la línea de prueba correspondiente a ese antibiótico y llegará a la línea C. Para la interpretación visual de los resultados de la prueba, cualquier intensidad de señal de la línea de prueba que sea más fuerte que la señal en la línea C indica un resultado negativo. Una señal en cualquier línea de prueba que sea igual o menos intensa en comparación con la línea C indica un resultado positivo.